WB實驗中的蛋白酶抑制劑

一、WB實驗中的蛋白酶抑制劑作用

WB實驗中的蛋白酶抑制劑主要是在蛋白質提取過程中，防止蛋白質水解，從而保持蛋白質的完整性。在蛋白質純化、提取過程中常受到其本身存在的水解酶的影響。在提取蛋白質的過程中細胞破碎釋放出蛋白酶，這些酶在與欲提取的蛋白質接觸時，一旦條件適宜，就會發(fā)生反應，導致蛋白質分解。

二、WB實驗中的蛋白酶抑制劑的作用原理

蛋白酶抑制劑（protease inhibitor）從廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團結合，使蛋白酶活力下降，甚至消失，但不使酶蛋白變性的物質。

三、WB實驗中的蛋白酶抑制劑的使用條件

1. 因為各種蛋白酶對不同蛋白質的敏感性相同，因此需要調整各種蛋白酶的濃度。

2. 由于蛋白酶抑制劑在液體中的溶解度極低，應注意在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑時應充分混勻，以減少蛋白酶抑制劑的沉淀。

四、常用的蛋白酶抑制劑的分類

1.苯甲基huang酰氟化物( PMSF)

2. 乙二胺四乙酸鈉( EDTA-Na2 )

3.胃蛋白酶抑制劑

4.亮抑蛋白酶肽

5.胰蛋白酶抑制劑

6.抑胃肽

7.胱蛋白酶抑制劑

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